SU-DHL-6(人彌散性組織淋巴瘤細胞)(STR鑒定正確)
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英文名稱:SU-DHL-6
貨號: CL-0746
價格: ¥1500 ¥1500
注:凍存細胞需加收干冰運費,詳情請咨詢客服。
套餐組合價
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | SU-DHL-6(人彌散性組織淋巴瘤細胞) |
別稱 | SUDHL6;SuDHL6;SU-DHL6;SUDHL-6;SuDHL-6;Sudhl-6;SUD6;Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6;DHL-6;DHL6 |
種屬 | 人 |
生長特性 | 懸浮細胞 |
細胞形態(tài) | 淋巴母細胞樣 |
凍存條件 |
凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO 溫度:液氮 |
培養(yǎng)方案A(默認) |
生長培養(yǎng)基:RPMI-1640 [PM150110]+10% FBS [164210]+1% P/S [PB180120] 培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO?,5%, 溫度:37℃ |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 3-4天/次 |
參考資料(來源文獻)
背景描述 | 從一名43歲的B細胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者的腹腔積液中建立,當時描述為彌漫性、混合性小細胞和大細胞型;細胞系攜帶EZH2 Y641N突變;屬于GCB樣淋巴瘤亞型(生發(fā)中心B細胞)。外顯子和RNA序列數(shù)據(jù)可用(參見參考文獻18187和外顯子序列和RNA序列) |
年齡(性別) | 43Y;Female |
組織來源 | 腹腔積液 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
腫瘤類型 | 淋巴瘤細胞 |
生物安全等級 | BSL-1 |
保藏機構 | AddexBio; C0003011/4672 ATCC; CRL-2959 CCTCC; GDC0164 DSMZ; ACC-572 KCB; KCB 2016029YJ-A |
位點信息
鑒定圖
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Q1:怎么去除死細胞?
低速離心(800rpm,離心3mim),主要是基于細胞密度和大小進行分離,死細胞和碎片比較輕,會殘留在上清,活的細胞會留在離心管底部哈。這個可以去除大部分死細胞和碎片,但不能完全去除(會有少許殘留)。
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Q2:有些細胞傳了幾代之后,突然出現(xiàn)了一些圓形的漂浮細胞,這是正常情況?
這個是正常的,細胞增殖是個動態(tài)的過程,每個細胞所處的狀態(tài)不完全一樣,這種漂浮的細胞里面可能是增殖后還未來的及貼下去的,也可能是一些衰老細胞,我們每次傳代的操作多少會引起一些細胞損傷導致細胞貼壁性能減弱。只要整體細胞增殖情況正常,存在少量這種細胞,可以繼續(xù)培養(yǎng)觀察看看。
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Q3:剛買回來的細胞傳多少代就凍存比較好?
建議細胞買回來擴增1~2代后先凍存一管,一周后復蘇看下細胞活力,確認細胞凍存條件合適后可以開始大量凍存。
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Q4:哪些因素會導致細胞死亡?
有多種因素可能導致這種情況:
1. 二氧化碳濃度不正確:檢查設置以確保 CO2 水平設置為適合您的細胞系的水平(通常在 5% 到 10% 之間);經(jīng)常檢查線路連接是否有泄漏,避免頻繁打開和關閉培養(yǎng)箱門。
2. 培養(yǎng)箱中的溫度波動:使用一個好用的溫度計在培養(yǎng)箱內(nèi)部監(jiān)測溫度。
3. 兩性霉素B或其他預防性抗生素/抗真菌藥物的濃度有毒:按照推薦的濃度使用。
4. 培養(yǎng)箱濕度不正確:檢查水盤中的水位,濕度對于許多細胞和培養(yǎng)基而言至關重要,通常我們需要保證培養(yǎng)箱時刻有水,也就是飽和濕度。
5. 培養(yǎng)基的滲透壓不正確:大多數(shù)哺乳動物細胞可以耐受 260 至 350 mOsm/kg 的滲透壓,過量添加某些試劑和藥物可能會影響滲透壓。
6. 微生物污染:細菌和真菌污染通常很容易看到;支原體污染的癥狀比較難辨別,需要仔細監(jiān)測細胞形態(tài)并定期進行檢測以及早發(fā)現(xiàn)污染。
7. 使用了不適當?shù)呐囵B(yǎng)基:確認所使用的培養(yǎng)基適用于您的細胞類型;需確認是否含有血清及必須營養(yǎng)成份、是否缺少某些微量元素成份、是否含有其他添加劑及藥物、培養(yǎng)基是否過效期、培養(yǎng)基保存方式是否得當。 -
Q5:SU-DHL-6細胞密度低狀態(tài)不好的時候,如何調整比較合適呢
根據(jù)細胞狀態(tài),可以離心收集所有的細胞,轉移到更小的器皿里培養(yǎng),適當提高血清濃度靜養(yǎng)。
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Q6:SU-DHL-6培養(yǎng)到什么程度可以傳代處理,多大比例傳代呢
可以按照密度傳代:5-8X10*5/ml密度傳,細胞密度不能太稀,否則容易生長緩慢。培養(yǎng)過程中會有細胞碎片和黑點,屬于正常情況,細胞密度低時,單顆細胞較多,密度高時,大部分為聚團細胞。營養(yǎng)消耗較快,培養(yǎng)基易變黃,及時補液或者換液。
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Q7:SU-DHL-6細胞復蘇的時候有什么需要注意的事項么?
細胞復蘇相對困難,復蘇后48h內(nèi)不要動細胞。有黑點和碎片也不要擔心,后續(xù)傳代可以低速離心去掉部分細胞碎片和黑點哈。
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Q8:不同引種單位的同一株細胞,RRID都是一樣的嗎?
是的,同一個細胞系只有一個RRID。
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Q9:凍存的細胞出現(xiàn)顏色不一致,有的紅有的粉,對復蘇會有影響嗎?
這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn),與凍存細胞的密度、凍存液配方、溫度導致pH變化等有關,偶爾有遇到這種情況,不是絕對性對細胞狀態(tài)有影響,可以復蘇看下。
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Q10:培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)瓶可以重復利用嗎?
一般不建議重復利用,特別是貼壁不牢固細胞,重復利用會導致吸附性變差,漂浮增多;一個T25瓶建議使用最多不超過3次,其次需要注意無菌操作,避免污染。

識別碼示意圖