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外泌體分離試劑盒(沉淀法)

英文名:Exosome Isolation Kit (Precipitation)

貨號:P-CA-505

價格:¥780 ¥1580

規(guī)格:
20 Tests
  • 20 Tests
  • 50 Tests
數(shù)量: - +
  • 外泌體分離試劑盒(沉淀法)
  • 外泌體分離試劑盒(沉淀法)
產(chǎn)品概述
產(chǎn)品描述 本產(chǎn)品是一款沉淀法外泌體分離試劑盒,可用于多種樣本的外泌體分離,具有操作簡便、分離速度快和外泌體回收率高等特點。本試劑盒分離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流式粒徑分析、電鏡檢測、組學研究、細胞和動物功能研究等。
分離方法 聚合物沉淀法
產(chǎn)品優(yōu)勢 1. 適用樣本廣 血漿、血清等復雜樣本和細胞上清、尿液等簡單樣都都適用;
2. 回收率高 相較于其他方法,獲取的外泌體濃度高;
3. 操作簡便 不需特殊設備,操作簡便;
4. 快速 外泌體分離僅需1.5 h;
5. 重復性好 基本無操作熟練度要求;
6. 高通量 能同時處理多個樣本。
運輸條件 冰袋運輸
保存條件 2-8℃
保質期 18個月
產(chǎn)品組分
規(guī)格 組分名稱 含量 保藏溫度
20 Tests/50 Tests Exosome Precipitation Solution 10 mL/25 mL 2-8℃
20 Tests/50 Tests Solution A 25 mL/25 mL 2-8℃
自備儀器耗材
高速冷凍離心機、離心管
使用方法

1. 準備工作

1) 去試劑盒中2-8保存組分(Exosome Precipitation Solution、Solution A)從冰箱拿出,恢復至室溫

2) 建議選擇新鮮樣本;如果樣本保存在-80℃,請在37℃水浴鍋中解凍,備用。

2. 樣品預處理

1) 去除細胞。4℃,300 g,離心5 min,轉移上清到新的離心管;

注意:對無細胞的樣品,可以跳過此步驟。

2) 去除細胞及細胞碎片。4℃,2000 g,離心10 min,轉移上清到新的離心管;

3) 去除大體積顆粒。步驟 2得到的上清,4℃,14000 g,離心30 min,轉移上清到新的離心管。

注意:去除大體積顆粒(大囊泡)的替代方法:將步驟 2)得到的上清,經(jīng)0.2 μm微孔濾膜過濾,收集濾出液。

3. 沉淀外泌體

1) 根據(jù)外泌體樣本類型,選擇合適的操作方案:

血清、血漿外泌體樣本操作方案

取預處理后樣品500 μL1.5 mL離心管,加入500 μL Solution A混勻,然后再加入250 μL Exosome Precipitation Solution,上下顛倒充分混勻;

注意:如果需要調整血清/血漿外泌體樣品體積,可以按樣本:Solution AExosome Precipitation Solution = 221的體積比,等比例放大或縮小。

細胞培養(yǎng)上清、尿液外泌體樣本操作方案

取預處理后樣品1 mL1.5 mL離心管,加入250 μL Exosome Precipitation Solution,上下顛倒充分混勻;

a. 若樣品體積過大,可以濃縮到1-2mL后,再進行該步驟。

b. 如果需要調整細胞培養(yǎng)上清 / 尿液外泌體樣品體積,可以按樣本:Exosome Precipitation Solution = 41的體積比,等比例放大或縮小。

2) 室溫孵育30min (快速流程);

注意:如果時間充裕,推薦4℃ 孵育過夜 (高回收流程)。

3) 置于離心機4℃12000 g離心30 min,棄上清。

注意:吸棄或小心傾倒上清后,用200 μL移液器盡可能吸凈上清。

4. 回收外泌體

1) 外泌體重懸。向上述沉淀中加入200 μL Solution A,用移液器輕柔上下吹打混勻;

2) 收集外泌體顆粒。將重懸液轉移至新的1.5 mL離心管,4℃ 12000 g 離心5 min,保留上清液,該

上清液中富含外泌體顆粒。

注意:若沉淀較多,取離心后上清液,12000 g,5 min,離心多次,直至無明顯沉淀,獲取上清液即為外泌體。

3) 分離的外泌體可立即開展后續(xù)實驗。24 h內進行后續(xù)實驗,可4℃保存;否則分裝后保存在-80℃。

FAQs

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A:

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