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外泌體分離試劑盒(沉淀法)
英文名:Exosome Isolation Kit (Precipitation)
貨號:P-CA-505
價格:¥780 ¥1580¥¥
- 20 Tests
- 50 Tests
產(chǎn)品概述
產(chǎn)品描述 | 本產(chǎn)品是一款沉淀法外泌體分離試劑盒,可用于多種樣本的外泌體分離,具有操作簡便、分離速度快和外泌體回收率高等特點。本試劑盒分離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流式粒徑分析、電鏡檢測、組學研究、細胞和動物功能研究等。 |
分離方法 | 聚合物沉淀法 |
產(chǎn)品優(yōu)勢 | 1. 適用樣本廣 血漿、血清等復雜樣本和細胞上清、尿液等簡單樣都都適用; 2. 回收率高 相較于其他方法,獲取的外泌體濃度高; 3. 操作簡便 不需特殊設備,操作簡便; 4. 快速 外泌體分離僅需1.5 h; 5. 重復性好 基本無操作熟練度要求; 6. 高通量 能同時處理多個樣本。 |
運輸條件 | 冰袋運輸 |
保存條件 | 2-8℃ |
保質期 | 18個月 |
產(chǎn)品組分
規(guī)格 | 組分名稱 | 含量 | 保藏溫度 |
20 Tests/50 Tests | Exosome Precipitation Solution | 10 mL/25 mL | 2-8℃ |
20 Tests/50 Tests | Solution A | 25 mL/25 mL | 2-8℃ |
自備儀器耗材
使用方法
1. 準備工作
1) 去試劑盒中2-8℃保存組分(Exosome Precipitation Solution、Solution A)從冰箱拿出,恢復至室溫。
2) 建議選擇新鮮樣本;如果樣本保存在-80℃,請在37℃水浴鍋中解凍,備用。
2. 樣品預處理
1) 去除細胞。4℃,300 g,離心5 min,轉移上清到新的離心管;
注意:對無細胞的樣品,可以跳過此步驟。
2) 去除細胞及細胞碎片。4℃,2000 g,離心10 min,轉移上清到新的離心管;
3) 去除大體積顆粒。步驟 2)得到的上清,4℃,14000 g,離心30 min,轉移上清到新的離心管。
注意:去除大體積顆粒(大囊泡)的替代方法:將步驟 2)得到的上清,經(jīng)0.2 μm微孔濾膜過濾,收集濾出液。
3. 沉淀外泌體
1) 根據(jù)外泌體樣本類型,選擇合適的操作方案:
l 血清、血漿外泌體樣本操作方案
取預處理后樣品500 μL到1.5 mL離心管,加入500 μL Solution A混勻,然后再加入250 μL Exosome Precipitation Solution,上下顛倒充分混勻;
注意:如果需要調整血清/血漿外泌體樣品體積,可以按樣本:Solution A:Exosome Precipitation Solution = 2:2:1的體積比,等比例放大或縮小。
l 細胞培養(yǎng)上清、尿液外泌體樣本操作方案
取預處理后樣品1 mL到1.5 mL離心管,加入250 μL Exosome Precipitation Solution,上下顛倒充分混勻;
a. 若樣品體積過大,可以濃縮到1-2mL后,再進行該步驟。
b. 如果需要調整細胞培養(yǎng)上清 / 尿液外泌體樣品體積,可以按樣本:Exosome Precipitation Solution = 4:1的體積比,等比例放大或縮小。
2) 室溫孵育30min (快速流程);
注意:如果時間充裕,推薦4℃ 孵育過夜 (高回收流程)。
3) 置于離心機4℃,12000 g離心30 min,棄上清。
注意:吸棄或小心傾倒上清后,用200 μL移液器盡可能吸凈上清。
4. 回收外泌體
1) 外泌體重懸。向上述沉淀中加入200 μL Solution A,用移液器輕柔上下吹打混勻;
2) 收集外泌體顆粒。將重懸液轉移至新的1.5 mL離心管,4℃ 12000 g 離心5 min,保留上清液,該
上清液中富含外泌體顆粒。
注意:若沉淀較多,取離心后上清液,12000 g,5 min,離心多次,直至無明顯沉淀,獲取上清液即為外泌體。
3) 分離的外泌體可立即開展后續(xù)實驗。24 h內進行后續(xù)實驗,可4℃保存;否則分裝后保存在-80℃。
FAQs
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A:
產(chǎn)品資料
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