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最全MKN-45細胞知識總結(jié)
來源:Pricella 瀏覽量: 發(fā)布時間:2023-09-13 14:00:00
本期細胞學堂為您整理了MKN-45細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和培養(yǎng)方法,幫助大家快速上手開展實驗~
MKN-45細胞呈半貼壁半懸浮生長,部分松散堆積,細胞排列不規(guī)則,生長中的細胞邊緣也不明確。
MKN-45細胞系相差顯微圖[1]
MKN-45細胞顯微鏡圖
MKN-45細胞顯微鏡圖
MKN-45細胞顯微鏡圖,100X
掃描電鏡顯示MKN-45細胞相當扁平,細胞表面有大量的微絨毛,細胞邊緣有長線狀的細胞質(zhì)突起,相鄰的細胞呈橋粒連接。
MKN-45細胞掃描電鏡圖[1]
MKN-45細胞掃描電鏡圖[1]
裸鼠荷瘤實驗,即將細胞或組織通過原位或皮下移植到裸鼠體內(nèi)形成經(jīng)常潰瘍的腫瘤,觀察腫瘤的形成、發(fā)展及抗腫瘤藥物的效果。MKN-45為該實驗的常用細胞株。
將MKN-45細胞皮下移植到裸鼠體內(nèi)后,MKN-45異種移植物顯示侵襲性生長到宿主動物的皮下肌肉。
無胸腺裸鼠皮下MKN-45腫瘤[1]
MKN-4細胞為半貼壁半懸浮細胞,需分懸浮細胞和貼壁細胞兩部分處理。
懸浮細胞部分
直接收集培養(yǎng)基至離心管中1200rpm/min離心3min。
貼壁細胞部分
按照貼壁細胞的方式消化處理:
1
加入2mL左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS(含有少量懸浮細胞,可轉(zhuǎn)移至收集了懸浮細胞的離心管中離心);
2
加入1mL左右0.25%含EDTA的胰酶,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
3
放入培養(yǎng)箱消化,消化3-5min,顯微鏡下看到細胞中間的細胞明顯分離變圓,側(cè)立培養(yǎng)瓶細胞可以滑落時可終止消化(消化時間主要看消化狀態(tài),如果沒有變圓,側(cè)立時不能滑落時,可適當延長30-60s),全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
4
加入3mL含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
5
收集細胞懸液,1200rpm/min離心3分鐘,離心后吸出上清丟棄。
●參考文獻●
(部分圖片來源于網(wǎng)絡)