適用細(xì)胞系 

雜交瘤無血清培養(yǎng)基是普諾賽研發(fā)團(tuán)隊(duì)開發(fā)的無血清產(chǎn)品，適用于雜交瘤、骨髓瘤細(xì)胞的高密度生長和蛋白的穩(wěn)定表達(dá)。 

培養(yǎng)基特性

1. 本品不含血清，含有少量水解物、蛋白、生長因子組分。

2. 培養(yǎng)基含有L-谷氨酰胺和HT。 

培養(yǎng)條件

1. 培養(yǎng)溫度37℃±0.5℃，搖床轉(zhuǎn)速100-120rpm（振幅50 mm）。

2. 在非自動(dòng)控制pH值條件下，建議CO₂濃度控制在5%。

3. pH、DO及溫度等工藝條件可根據(jù)工藝開發(fā)結(jié)果或平臺工藝參數(shù)設(shè)定。

培養(yǎng)基適應(yīng)（推薦）

1. 直接適應(yīng)：最初培養(yǎng)階段，細(xì)胞按初始密度 0.75×10⁶cells/mL 接種，直接將培養(yǎng)基更換為雜交瘤無血清培養(yǎng)基，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。待細(xì)胞培養(yǎng)2-3代，且細(xì)胞生長穩(wěn)定后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。雜交瘤細(xì)胞穩(wěn)定生長時(shí)按照0.75×10⁶cells/mL密度接種，培養(yǎng)48h后細(xì)胞密度可達(dá)3-5×10⁶ cells/mL。

2. 間接適應(yīng)：雜交瘤無血清培養(yǎng)基與細(xì)胞原培養(yǎng)基1:1比例混合，培養(yǎng)細(xì)胞，連續(xù)傳代2-3代，細(xì)胞穩(wěn)定生長后可將培養(yǎng)基更換為雜交瘤無血清培養(yǎng)基，連續(xù)傳代2-3代，細(xì)胞生長穩(wěn)定后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。雜交瘤細(xì)胞穩(wěn)定生長時(shí)按照0.75×10⁶cells/mL密度接種，培養(yǎng)48h后細(xì)胞密度可達(dá)3-5×10⁶cells/mL。

（注：具體培養(yǎng)工藝可根據(jù)實(shí)際項(xiàng)目需求自行調(diào)整）

數(shù)據(jù)支撐

細(xì)胞凍存

1. 使用本品制成的凍存培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞凍存，配制細(xì)胞凍存液：凍存液=70%培養(yǎng)基+20%FBS(建議使用進(jìn)口胎牛血清)+10%DMSO，凍存液配好后置于4℃冰箱預(yù)冷(凍存液配制時(shí)，先加培養(yǎng)基再加血清或DMSO，防止DMSO濃度過高導(dǎo)致血清有效成分變性)。

2. 細(xì)胞凍存密度1.5-2.0×10⁷cells/mL，推薦2.0×10⁷cells/mL。

保存條件

2-8℃，避光保存，有效期12個(gè)月。

SF3001 雜交瘤無血清培養(yǎng)基.pdf