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產(chǎn)品概述
Advanced RPMI-1640培養(yǎng)基是一款可以減少胎牛血清(FBS)添加量,廣泛應(yīng)用于哺乳動物細胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,與經(jīng)典RPMI-1640培養(yǎng)基相比,在保持細胞生長速率和形態(tài)的情況下,血清用量可減少50-90%,從而降低細胞培養(yǎng)過程中血清用量,有效降低細胞培養(yǎng)成本。許多細胞系不需要馴化即可使用這種培養(yǎng)基,無需馴化即可成功培養(yǎng)的細胞包括Vero、Raji、Daudi、Jurkat, Clone E6-1、THP-1、4T1、CT26.WT、PC-12 (High differentiation)、22RV1、BxPC-3、B16-F10等。
產(chǎn)品信息
形態(tài) | 液體 |
濃度 | 1× |
規(guī)格 | 500 mL |
pH | 7.0-7.4 |
D-葡萄糖 | 2000 mg/L |
L-谷氨酰胺 | 300 mg/L |
丙酮酸鈉 | 110 mg/L |
酚紅 | 5 mg/L |
非必需氨基酸 | 有 |
HEPES | 無 |
滲透壓 | 260-305 mOsm/kg |
溶劑 | 純化水 |
儲存條件 | 2-8℃,避光 |
運輸條件 | 冰袋運輸 |
有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品使用說明
1. Advanced RPMI-1640培養(yǎng)基作為一款減血清培養(yǎng)基,能達到減血清效果是因為添加了以下成分:乙醇胺、谷胱甘肽、抗壞血酸、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、牛血清白蛋白以及多種微量元素(亞硒酸鈉、偏釩酸銨、硫酸銅和氯化錳)。
2. Advanced RPMI-1640培養(yǎng)基使用時需要補充1–5%胎牛血清和L-丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液(GlutaMAX)(貨號:PB180419)以維持細胞正常生長。
3. 部分細胞培養(yǎng)使用胎牛血清(FBS)的推薦添加量:
細胞名稱 | FBS推薦添加量 |
Vero | 5% |
Raji | 5% |
Daudi | 5% |
Jurkat, Clone E6-1 | 2-5% |
THP-1 | 5% |
4T1 | 2-5% |
CT26.WT | 2-5% |
PC-12(High differentiation) | 5% |
22RV1 | 5% |
BxPC-3 | 5% |
B16-F10 | 5% |
(列表以外的細胞請參考下方方法測試優(yōu)化)
對于大多數(shù)細胞系,使用Advanced培養(yǎng)基時不需要適應(yīng),可直接降低血清50%而不影響細胞狀態(tài),參考直接適應(yīng)方法。如果觀察到細胞生長速度變慢、形態(tài)改變、次級代謝物產(chǎn)生水平不理想或需要進一步降低血清濃度時,則需采取一定的方法使之間接適應(yīng)低血清環(huán)境,參考間接適應(yīng)法。
直接適應(yīng)
(1) 直接使用降低50%胎牛血清的Advanced培養(yǎng)基,替換原有的常規(guī)完全培養(yǎng)基,按照常規(guī)培養(yǎng)方法換液和傳代培養(yǎng)。
(2) 細胞能夠持續(xù)增長維持3代以上,可以認為細胞已經(jīng)適應(yīng)新培養(yǎng)基。
注:如果培養(yǎng)過程中觀察到細胞狀態(tài)不佳,則需采用間接自適應(yīng)的方法。
間接適應(yīng)
(1) 采取Advanced完培:原配方完培=25:75的比例混合新舊培養(yǎng)基;
(2) 監(jiān)測細胞生長和傳代培養(yǎng),逐步增加新培養(yǎng)基與原始培養(yǎng)基的比例直至全部更換為新的Advanced培養(yǎng)基,參考25:75→50:50→75:25→90:10→100:0的順序,每個步驟可能需要多次重復(fù)直至細胞100%適應(yīng)新的減血清培養(yǎng)基。
(3) 在100%的Advanced減血清完全培養(yǎng)基中細胞持續(xù)增長3代以上,可認為已適應(yīng)新培養(yǎng)基。
注意事項
1. 并非所有的細胞都適合減血清培養(yǎng),務(wù)必小量測試使用效果后進行替換,必要時需針對每種細胞系優(yōu)化胎牛血清濃度,以達到較大限度的減少血清添加量;
2. 本產(chǎn)品已過濾除菌,使用時應(yīng)注意無菌操作,避免污染;
3. 為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,請勿進行凍融處理;
4. 本產(chǎn)品僅用于科研或進一步研究使用,不用于診斷和治療。
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FAQs
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