Advanced DMEM/F12培養(yǎng)基是一款可以減少胎牛血清（FBS）添加量，廣泛應用于哺乳動物細胞培養(yǎng)的基礎培養(yǎng)基，與經典DMEM/F12培養(yǎng)基相比，在保持細胞生長速率和形態(tài)的情況下，血清用量可減少50-90%，從而降低細胞培養(yǎng)過程中血清用量，有效降低細胞培養(yǎng)成本。許多細胞系不需要馴化即可使用這種培養(yǎng)基，無需馴化即可成功培養(yǎng)的細胞包括Vero、LX-2、KGN、C8-D1A、Hela、NIH-3T3、KLE、ARPE-19、4T1、NIH-3T3、JHH-7、NCI-H2009等。

產品信息

產品使用說明

1. Advanced DMEM/F12培養(yǎng)基作為一款減血清培養(yǎng)基，能達到減血清效果是因為添加了以下成分：乙醇胺、谷胱甘肽、抗壞血酸、胰島素、轉鐵蛋白、牛血清白蛋白以及多種微量元素（亞硒酸鈉、偏釩酸銨、硫酸銅和氯化錳）。

2. Advanced DMEM/F12培養(yǎng)基使用時需要補充1–5%胎牛血清和L-丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液（GlutaMAX）（貨號:PB180419）以維持細胞正常生長。

3. 部分細胞培養(yǎng)使用胎牛血清（FBS）的推薦添加量：

（列表以外的細胞請參考下方方法測試優(yōu)化）

       對于大多數細胞系，使用Advanced培養(yǎng)基時不需要適應，可直接降低血清50%而不影響細胞狀態(tài)，參考直接適應方法。如果觀察到細胞生長速度變慢、形態(tài)改變、次級代謝物產生水平不理想或需要進一步降低血清濃度時，則需采取一定的方法使之間接適應低血清環(huán)境，參考間接適應法。

直接適應

(1) 直接使用降低50%胎牛血清的Advanced培養(yǎng)基，替換原有的常規(guī)完全培養(yǎng)基，按照常規(guī)培養(yǎng)方法換液和傳代培養(yǎng)。

(2) 細胞能夠持續(xù)增長維持3代以上，可以認為細胞已經適應新培養(yǎng)基。

注:如果培養(yǎng)過程中觀察到細胞狀態(tài)不佳，則需采用間接自適應的方法。

間接適應

(1) 采取Advanced完培：原配方完培=25:75的比例混合新舊培養(yǎng)基；

(2) 監(jiān)測細胞生長和傳代培養(yǎng)，逐步增加新培養(yǎng)基與原始培養(yǎng)基的比例直至全部更換為新的Advanced培養(yǎng)基，參考25:75→50:50→75:25→90:10→100：0的順序，每個步驟可能需要多次重復直至細胞100%適應新的減血清培養(yǎng)基。

(3) 在100%的Advanced減血清完全培養(yǎng)基中細胞持續(xù)增長3代以上，可認為已適應新培養(yǎng)基。

注意事項

1. 并非所有的細胞都適合減血清培養(yǎng)，務必小量測試使用效果后進行替換，必要時需針對每種細胞系優(yōu)化胎牛血清濃度，以達到較大限度的減少血清添加量；

2. 本產品已過濾除菌，使用時應注意無菌操作，避免污染；

3. 為保持本產品的最佳使用效果，請勿進行凍融處理；

4. 本產品僅用于科研或進一步研究使用，不用于診斷和治療。

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