大鼠胚胎干細(xì)胞

Cat NO.: CP-R320

1. 產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠胚胎干細(xì)胞

2. 組織來(lái)源：囊胚

3. 產(chǎn)品規(guī)格：5×10⁵cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4. 細(xì)胞簡(jiǎn)介：

   大鼠胚胎干細(xì)胞分離自囊胚胚胎組織；胚胎干細(xì)胞(Embryonic stem cell，ESCs，簡(jiǎn)稱(chēng)ES、EK或ESC細(xì)胞)是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞，它具有體外培養(yǎng)無(wú)限增殖、自我更新和多向分化的特性。無(wú)論在體外還是體內(nèi)環(huán)境，ES細(xì)胞都能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體幾乎所有的細(xì)胞類(lèi)型。進(jìn)一步說(shuō)，胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)是一種高度未分化細(xì)胞。它具有發(fā)育的全能性，能分化出成體動(dòng)物的所有組織和器官，包括生殖細(xì)胞。ES細(xì)胞具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu)，細(xì)胞核大，有一個(gè)或幾個(gè)核仁，胞核中多為常染色質(zhì)，胞質(zhì)胞漿少，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。體外培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞排列緊密，呈集落狀生長(zhǎng)。用堿性磷酸酶染色，ES細(xì)胞呈棕紅色，而周?chē)某衫w維細(xì)胞呈淡黃色。細(xì)胞克隆和周?chē)嬖诿黠@界限，形成的克隆細(xì)胞彼此界限不清，細(xì)胞表面有折光較強(qiáng)的脂狀小滴。細(xì)胞克隆形態(tài)多樣，多數(shù)呈島狀或巢狀。小鼠ES細(xì)胞的直徑7 微米～18 微米，豬、牛、羊ES細(xì)胞的顏色較深，直徑12 微米～18 微米。胚胎干細(xì)胞與普通細(xì)胞有顯著差別，有其特定的生長(zhǎng)特性和特定的標(biāo)志，例如堿性磷酸酶活性非常高，帶有胚胎階段特異性表面抗原( Stage- specific embryonic antigens,SSEA)，人類(lèi)胚胎干細(xì)胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等標(biāo)志，這些特性和標(biāo)志均可以用于對(duì)胚胎干細(xì)胞進(jìn)行鑒定，除此之外，胚胎干細(xì)胞還可以在體外永久傳代，并保持正常核型。在體外培養(yǎng)體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子( Leukaemia inhibitory factor,LF)或者在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層(MEF)上培養(yǎng)時(shí)，胚胎干細(xì)胞都能呈克隆性增殖，長(zhǎng)期保持核型正常和穩(wěn)定，凍存解凍也不影響不分化的特性。另外，胚胎干細(xì)胞還表現(xiàn)岀高水平端粒酶活性，目前證明端粒酶與細(xì)胞衰老密切相關(guān)，多數(shù)成熟細(xì)胞的端粒酶活性都很低。這些都是胚胎干細(xì)胞與成熟細(xì)胞不同的重要特點(diǎn)，也可能是其復(fù)制生命期限遠(yuǎn)比體細(xì)胞長(zhǎng)的原因。

5. 方法簡(jiǎn)介：

   普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚胎干細(xì)胞采用分離囊胚組織，去除胚胎透明帶、使用特制專(zhuān)用培養(yǎng)基篩選培養(yǎng)，胰酶消化傳代純化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

6. 質(zhì)量檢測(cè)：

   普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)Oct-4免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7. 培養(yǎng)信息：

   包被條件	明膠(0.1%)
   培養(yǎng)基	含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等
   產(chǎn)品貨號(hào)	CM-R320
   換液頻率	每2-3天換液一次
   生長(zhǎng)特性	貼壁
   細(xì)胞形態(tài)	短梭形、多角形
   傳代特性	可傳3-5代左右
   消化液	0.025%胰蛋白酶
   培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%

   大鼠胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用普諾賽配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

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