Q1:BV2細胞傳代培養(yǎng)時，發(fā)現(xiàn)細胞拉絲、觸角較多，如何調(diào)整？

BV2細胞以較低密度傳代后，容易出現(xiàn)拉絲、觸角較多的情況。這種情況可以先收集培養(yǎng)基中懸浮或貼壁不牢的細胞于15 mL離心管中，貼壁的細胞用胰酶消化1 min左右后終止消化，收集消化下來的的細胞（多觸角或者拉絲很長的細胞，短時消化不容易消化下來，可以被篩掉），然后計數(shù)傳代，培養(yǎng)一段時間后細胞狀態(tài)會有好轉(zhuǎn)。沒有消化下來的細胞也可以提高細胞密度傳代，重復(fù)此步驟，收集偏圓形的細胞培養(yǎng)。

Q2:BV2細胞剛收到貨時，細胞整體偏圓形較多，而后續(xù)培養(yǎng)時梭形較多是怎么回事？

細胞形態(tài)會隨著密度的改變發(fā)生變化。BV2細胞增殖較快，到貨時由于運輸震蕩的原因，部分細胞會出現(xiàn)收縮，此時細胞密度較高，圓形相對較多；在后續(xù)培養(yǎng)中，按照1:2~1:4傳代24 h時，細胞主要以梭形為主；后續(xù)隨著細胞密度越來越高，圓形細胞會逐漸變多。

Q3:BV2細胞形態(tài)變?yōu)榘⒚装蜆?/h4>

小膠質(zhì)細胞是一種可塑性極高的細胞，可通過特定因素激活，從而發(fā)揮其免疫功能。從靜息態(tài)變?yōu)榧せ顟B(tài)的過程中，小膠質(zhì)細胞形態(tài)也隨之發(fā)生改變。 實驗中常用細菌脂多糖（LPS）和干擾素-γ（IFNγ），分別模擬細菌和病毒感染，來刺激小膠質(zhì)細胞激活。受到刺激的小膠質(zhì)細胞突起縮短變厚，胞體增大，呈現(xiàn)阿米巴樣（如下圖所示）。 但有的時候BV2形態(tài)變化并不明顯，還需要結(jié)合其他實驗，如檢測NO、IL-13等炎癥因子的表達，來確定BV2是否被定向激活。

Q4:BV2細胞形態(tài)的問題：培養(yǎng)過程梭型細胞比圓形細胞多，梭型是不是細胞分化了？

細胞受到LPS刺激后易分化，而常規(guī)培養(yǎng)過程是不會自發(fā)分化的。關(guān)于哪種形態(tài)是分化，并沒有統(tǒng)一的定論，有的文獻描述分化細胞是長梭型細胞增加，有的文獻稱分化細胞偏圓形，建議通過檢測相關(guān)的指標(biāo)變化來判斷是否分化。 該細胞在培養(yǎng)時，高密度下貼壁的細胞形態(tài)會偏圓形，低密度下貼壁細胞形態(tài)會偏長條形。密度比較高的時候，漂浮的細胞會聚團。存在圓形和梭形兩種細胞形態(tài)。

Q5:BV2細胞是激活態(tài)還是靜息態(tài)？

在基礎(chǔ)培養(yǎng)條件下，BV2細胞通常處于靜息狀態(tài)，也可以根據(jù)實驗需求，調(diào)控BV2為靜息狀態(tài)或激活狀態(tài)。BV2是一種半貼壁半懸浮細胞，它的形態(tài)并不規(guī)則，存在圓形和梭形兩種，有的文獻中說梭型的細胞是極化的，有的文獻中說圓形的細胞是極化的，但是在實際培養(yǎng)過程中，圓形和梭型細胞并沒有一個特定比例，判斷哪種形態(tài)的細胞是激活態(tài)和靜息態(tài)，無法通過形態(tài)辨認，細胞是否被定向激活，需要結(jié)合實驗來檢測相關(guān)指標(biāo)的表達情況，如NO、IL-13等炎癥因子的表達。 可以通過添加特定的誘導(dǎo)物（如LPS、IFN-γ等），以誘導(dǎo)其進入激活狀態(tài)。

Q6:BV2用MEM培養(yǎng)可以嗎？

可以的，這個細胞有兩種培養(yǎng)條件，DEME和MEM，所以使用MEM培養(yǎng)BV2細胞是可行的，但需要確保培養(yǎng)基中含有足夠的營養(yǎng)成分，如血清和其他補充物。如果在使用MEM過程中遇到生長緩慢或細胞狀態(tài)不佳的問題，可以考慮調(diào)整培養(yǎng)基成分或改為使用DMEM。通過仔細觀察和記錄細胞生長狀態(tài)并根據(jù)需要調(diào)整培養(yǎng)條件，可以確保BV2細胞在DEME或MEM培養(yǎng)基中的良好生長。