當(dāng)前位置：首頁(yè) >> 技術(shù)支持 >> 實(shí)驗(yàn)指南 >> 詳細(xì)內(nèi)容

技術(shù)支持Technical Support

聯(lián)系我們CONTACT US

400-999-210024小時(shí)服務(wù)熱線
sales@procell.com.cn銷售郵箱

細(xì)胞學(xué)堂 | UMNSAH/DF-1（雞胚成纖維細(xì)胞）空泡產(chǎn)生的原因及解決方法

來(lái)源：Pricella　　瀏覽量：　　發(fā)布時(shí)間：2022-06-28 14:00:05

UMNSAH/DF-1細(xì)胞在收貨時(shí)經(jīng)常會(huì)遇到“空泡”問(wèn)題，今天給大家分享一下，空泡產(chǎn)生的原因，以及解決空泡問(wèn)題的方法。

先了解一下UMNSAH/DF-1細(xì)胞的各項(xiàng)信息，如下：

細(xì)胞名稱：UMNSAH/DF-1（雞胚成纖維細(xì)胞）

種屬：家雞

組織來(lái)源：胚胎，自發(fā)永生化

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)培養(yǎng)基：DMEM＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣；5%CO₂

溫度：39℃

推薦傳代比例：1:3-1:4

凍存液配方：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

細(xì)胞中的空泡一般指在光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)的, 具有不同于細(xì)胞質(zhì)光學(xué)特征的泡狀物。細(xì)胞中形成空泡的過(guò)程和現(xiàn)象稱為空泡化?？张菘梢詠?lái)源于細(xì)胞內(nèi)所有膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，如線粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，溶酶體，高爾基體，自噬溶酶體等。

以 UMNSAH/DF-1細(xì)胞為例，在發(fā)貨前，細(xì)胞狀態(tài)是正常的（如圖1），可是在收貨后卻產(chǎn)生了很多空泡。這究竟是什么原因呢？

其實(shí)，這是因?yàn)閁MNSAH/DF-1細(xì)胞在發(fā)貨過(guò)程中，容易受到溫度波動(dòng)影響，而導(dǎo)致的細(xì)胞空泡增多。當(dāng)細(xì)胞受到外界環(huán)境因素影響如溫度時(shí)，細(xì)胞會(huì)發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)。細(xì)胞溫度降低時(shí)，細(xì)胞膜上磷脂分子的運(yùn)動(dòng)減慢，流動(dòng)性降低，從而降低了細(xì)胞膜對(duì)物質(zhì)的通透性，鈣離子內(nèi)流，從而導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)中色素堆積，空泡形成。

處理方法：

將收到的細(xì)胞正常傳代，觀察空泡是是否有減少，若空泡仍有很多，可增加傳代次數(shù)，一般正常傳代后這種情況就會(huì)有所好轉(zhuǎn)?。ㄈ鐖D2所示。）

圖1. UMNSAH/DF-1發(fā)貨圖片

圖2. UMNSAH/DF-1收貨圖片（左）傳代培養(yǎng)后圖片（右）

注意

細(xì)胞培養(yǎng)的最佳溫度主要取決于細(xì)胞供體的體溫，此外也受到解刨部位體溫差異的影響。對(duì)于不同的動(dòng)物細(xì)胞，所需要的培養(yǎng)溫度也有所不同，對(duì)于禽類動(dòng)物細(xì)胞，最佳培養(yǎng)溫度為39℃，所以UMNSAH/DF-1細(xì)胞的最佳培養(yǎng)溫度也為39℃。37℃培養(yǎng)會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài)，建議提前準(zhǔn)備專用培養(yǎng)箱。

若我們?cè)谂囵B(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中出現(xiàn)了空泡，也有可能是細(xì)胞凋亡或是營(yíng)養(yǎng)不夠等原因，針對(duì)不同的情況需要采用不同的解決辦法。在實(shí)驗(yàn)中，我們可以通過(guò)時(shí)刻關(guān)注細(xì)胞的狀態(tài)，及時(shí)換液，采用優(yōu)質(zhì)血清，保證細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)充足等，避免空泡的出現(xiàn)。

●參考文獻(xiàn)●

[1] Jing Q C , Zhao J , Zhao B X , et al. The vacuolization and differentiation of vascular endothelial cells by a γ-butyrolactones derivative[J]. Journal of Shandong University, 2008.

[2] 張浩赟等. 胞質(zhì)空泡化的研究進(jìn)展[J]. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘, 2017, 17(34):3.