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細(xì)胞學(xué)堂 | 培養(yǎng)BEAS-2B需要血清嗎
來源：Pricella 瀏覽量： 發(fā)布時間：2022-09-26 09:56:08
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BEAS-2B（人正常肺上皮細(xì)胞）是一種SV40大型t抗原永生化的人肺上皮細(xì)胞系，被廣泛用作肺上皮細(xì)胞的體外模型，包括毒理學(xué)測試、呼吸損傷、傷口愈合和腫瘤轉(zhuǎn)化；除此之外，它還是合適的轉(zhuǎn)染宿主。
BEAS-2B 的表型為何不同
BEAS-2B細(xì)胞為上皮細(xì)胞樣，而有客戶反應(yīng)，自己培養(yǎng)的形態(tài)像成纖維細(xì)胞（如圖1），不像上皮細(xì)胞，與權(quán)威細(xì)胞庫所展示的細(xì)胞形態(tài)不一致。
圖1. 客戶培養(yǎng)的BEAS-2B形態(tài)（僅供學(xué)習(xí)參考）
這是因?yàn)?span style="color: rgb(251, 181, 30);box-sizing: border-box;">BEAS-2B細(xì)胞保留了對血清反應(yīng)進(jìn)行鱗關(guān)分化的能力，培養(yǎng)時加與不加血清，會出現(xiàn)不同的細(xì)胞形態(tài)。BEAS-2B常用的培養(yǎng)條件有2種：BEBM 支氣管上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基（不含血清），或DMEM+10%FBS。
用不含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)時，BEAS-2B細(xì)胞具有典型的呼吸上皮細(xì)胞多邊形態(tài)；用含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)時，密度低時細(xì)胞形態(tài)會呈長梭型，但密度高一些以后形態(tài)會變短。
注意：
#傳代密度不能太低，最少不能低于60%；
#使用BEBM培養(yǎng)基培養(yǎng)時，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)先涂有溶解在BEBM培養(yǎng)基中的 0.01 mg/mL 纖連蛋白、0.03 mg/mL I 型牛膠原蛋白和 0.01 mg/mL 牛血清白蛋白的混合物；
#血清影響細(xì)胞貼壁性，進(jìn)一步影響細(xì)胞形態(tài)；
#培養(yǎng)條件的改變對細(xì)胞形態(tài)和功能都有影響；
#不要隨意更改細(xì)胞培養(yǎng)條件。
有無血清對細(xì)胞的影響
1
比較添加或不添加胎牛血清的BEAS-2B全基因組基因表達(dá)，發(fā)現(xiàn)多種生物途徑的表達(dá)發(fā)生了改變，包括與致癌和能量代謝相關(guān)的途徑；
2
對BEAS-2B中耗氧量和糖酵解的實(shí)時測量表明，胎牛血清培養(yǎng)條件下，總糖酵解能力增加1.4倍，基礎(chǔ)呼吸增加1.9倍；
3
與不含胎牛血清的BEAS-2B相比，ATP產(chǎn)生的氧氣消耗增加0倍，最大呼吸增加 2.8倍；
4
比較胎牛血清暴露于1μM亞砷酸鈉引起的轉(zhuǎn)錄組變化導(dǎo)致的BEAS-2B的轉(zhuǎn)錄組變化，發(fā)現(xiàn)43%的亞砷酸鹽調(diào)節(jié)基因的 mRNA水平也受到胎牛血清的調(diào)節(jié)；
5
細(xì)胞毒性研究顯示，暴露于5%胎牛血清8周的BEAS-2B細(xì)胞對亞砷酸鹽細(xì)胞毒性的敏感性幾乎是非暴露于胎牛血清的BEAS-2B細(xì)胞的5倍；
6
胎牛血清誘導(dǎo)的BEAS-2B的表型變化表明，在使用BEAS-2B作為砷毒性的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜁r ，應(yīng)仔細(xì)考慮培養(yǎng)條件。
參考文獻(xiàn)
[1] Zhao F , Klimecki W T . Culture conditions profoundly impact phenotype in BEAS‐2B, a human pulmonary epithelial model[J]. Journal of Applied Toxicology Jat, 2015, 35(8):945-951.
注：部分圖片來源于網(wǎng)絡(luò)
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