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細(xì)胞學(xué)堂 | SK-BR-3總是漂怎么辦
來(lái)源：Pricella 瀏覽量： 發(fā)布時(shí)間：2022-10-10 13:39:34
SK-BR-3 [SKBR3]細(xì)胞（人乳腺腺癌細(xì)胞）是由Trempe·G和Old·L·J于1970年從一位43歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離得到的。SK-BR-3 [SKBR3]細(xì)胞過(guò)表達(dá)HER2/c-erb-2基因產(chǎn)物。
圖1. SK-BR-3正常生長(zhǎng)圖片
培養(yǎng)SK-BR-3細(xì)胞時(shí)，最容易遇到的問(wèn)題就是漂浮。SK-BR-3細(xì)胞從冷凍保存中恢復(fù)的速度可能很慢，并且在低溫保存恢復(fù)過(guò)程中可能會(huì)不貼壁，但這是正?，F(xiàn)象。SK-BR-3細(xì)胞在培養(yǎng)的第一周以及每次繼代培養(yǎng)后都會(huì)出現(xiàn)松散的附著和漂浮的細(xì)胞。
如果存在大量漂浮物，尤其是在生長(zhǎng)的第一周，復(fù)蘇后幾天內(nèi)最好保持細(xì)胞不受干擾；在剛收到細(xì)胞時(shí)，可根據(jù)細(xì)胞密度進(jìn)行傳代，傳代后3天不要?jiǎng)釉摷?xì)胞（如果培養(yǎng)基變色不明顯的話(huà)），處理后細(xì)胞鋪展?fàn)顟B(tài)良好（如圖2）。
圖2. 處理后的SK-BR-3細(xì)胞
（圖片來(lái)源于客戶(hù)，僅供學(xué)習(xí)參考）
如果仍然有很多漂浮物，可用臺(tái)盼藍(lán)檢查細(xì)胞是否存活?？蓪⑵〉募?xì)胞收集起來(lái)，通過(guò)輕輕離心保留漂浮細(xì)胞，并在更換培養(yǎng)基時(shí)將其與附著的細(xì)胞一起添加回同一培養(yǎng)容器中，不要分離或丟棄漂浮細(xì)胞。
細(xì)胞最初會(huì)以小斑塊或細(xì)胞群的形式附著，許多細(xì)胞團(tuán)仍處于懸浮狀態(tài)，幾天后，細(xì)胞將貼壁生長(zhǎng)并向外延伸，有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)一些細(xì)胞碎片，通過(guò)換液可去除。
注意事項(xiàng)
漂浮細(xì)胞應(yīng)始終通過(guò)溫和離心（125xg，持續(xù)5至7分鐘）保留，并在換液或傳代后放回培養(yǎng)容器；
SK-BR-3細(xì)胞傾向于相互堆積。在細(xì)胞達(dá)到70-80%匯合度之前不要用胰酶消化處理細(xì)胞。如果讓細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)，細(xì)胞就會(huì)分離漂?。?/p>
1周傳代1次，若密度低，生長(zhǎng)一周后可以1:1傳代重新鋪板一次，細(xì)胞形態(tài)會(huì)好看很多。
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