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細胞學堂 | 神經(jīng)元細胞漂浮問題處理大全

來源:Pricella  瀏覽量:  發(fā)布時間:2022-11-08 13:22:01

 

神經(jīng)元是具有長突觸(軸突)的細胞,它由細胞體和細胞突起構(gòu)成。在長的軸突上套有一層鞘,組成神經(jīng)纖維,它的末端的細小分支叫做神經(jīng)末梢。

細胞體位于腦、脊髓和神經(jīng)節(jié)中,細胞突起可延伸至全身各器官和組織中。細胞突起是由細胞體延伸出來的細長部分,又可分為樹突和軸突。每個神經(jīng)元可以有一或多個樹突,可以接受刺激并將興奮傳入細胞體;每個神經(jīng)元只有一個軸突,可以把興奮從胞體傳送到另一個神經(jīng)元或其他組織,如肌肉或腺體。


 大鼠皮層神經(jīng)元細胞

圖1. 大鼠皮層神經(jīng)元細胞


神經(jīng)元細胞比較脆弱,收貨時細胞可能會漂。

今天,普諾賽就教大家如何處理收貨漂浮,并整理好了培養(yǎng)注意事項,讓您的實驗順暢無阻!


收到有漂的細胞怎么辦

1

到貨后先不用開瓶,放培養(yǎng)箱穩(wěn)定4小時;

2

神經(jīng)元細胞由于對溫度和震動比較敏感,所以細胞收貨有漂的細胞團屬于正?,F(xiàn)象,如果還沒準備好做實驗,可收集細胞團放回原瓶培養(yǎng),并盡快準備實驗。若原瓶為不透氣瓶蓋,一定要擰松瓶蓋培養(yǎng),正常T25瓶留5~6mL培養(yǎng)液就好。


 如何處理漂的神經(jīng)元細胞團 

收集所有細胞懸液,1200rpm 5min離心,保留沉淀;

加入1mL左右0.125%胰酶輕柔重懸混勻細胞,不能吹打,放入4℃冰箱消化細胞,靜置3-5min;


消化時間到后,加入5mL完全培養(yǎng)基終止消化,1200rpm 5min離心;

去掉上清,加入5mL完全培養(yǎng)基(可補加1%FBS,促進貼壁)重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)(需對培養(yǎng)容器進行包被);

接種后絕對靜置24-48h,48h后觀察,否則細胞容易聚團。


培養(yǎng)注意事項 /


1

神經(jīng)元細胞不能傳代,在實驗準備好之前只需換液培養(yǎng),換液的時候注意收集漂的細胞團;

2

鋪板孔板要包被,消化用稀釋一倍的胰酶,即0.125%的胰酶(0.25%胰酶用PBS稀釋一倍),放4℃冰箱消化3~5min;

3

細胞遇冷易收縮脫落,所用試劑需37℃預熱,室溫觀察時間不宜過長;

4

神經(jīng)元細胞由于貼壁疏松,正常培養(yǎng)和發(fā)貨都用多聚賴氨酸包被過,所以消化時間要延長,或者分次消化;

5

正常養(yǎng)的好的神經(jīng)元細胞可以活很久,但是慢慢會有雜細胞生長,無法避免。所以如果實驗周期較長,建議在收貨一周內(nèi)盡快鋪板做實驗。


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