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細(xì)胞學(xué)堂 | 最常見的黑點污染：支原體和“黑膠蟲”
來源：Pricella 瀏覽量： 發(fā)布時間：2022-12-09 15:04:07
細(xì)胞污染是細(xì)胞培養(yǎng)中最常見、最棘手的問題，在發(fā)現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)異常時，一定要及時排查污染并進行處理，否則會給我們的實驗造成極大的影響。
在各種污染類型中，小普發(fā)現(xiàn)最為大家困擾的污染就是“黑點”，所以本期細(xì)胞學(xué)堂將為大家介紹細(xì)胞出現(xiàn)黑點時可能的污染類型：支原體污染和“黑膠蟲”污染。
支原體污染
支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞生長參數(shù)、代謝及研究的任一數(shù)據(jù)，并且，支原體缺乏細(xì)胞壁，所以常規(guī)的抗生素并不能對它們起到抵抗作用，而且由于其直徑太小，濾菌器也無法過濾。
圖1. 支原體污染
支原體污染常見表現(xiàn)：
1
細(xì)胞狀態(tài)變差、生長變慢，在顯微鏡下觀察可能會有小黑點，但培養(yǎng)基一般不渾濁；
2
細(xì)胞傳代以后就出現(xiàn)細(xì)胞間黑點、細(xì)胞空泡化或者很多類似凋亡、壞死的細(xì)胞，最終細(xì)胞漂浮，完全死亡。
“黑膠蟲”污染
“黑膠蟲”及其分解復(fù)合物是一種常見的細(xì)胞污染物，與細(xì)胞共生，隨細(xì)胞傳代而傳代，通?？股貙ζ錈o效?！昂谀z蟲”與細(xì)胞競爭性生長，對細(xì)胞生長不利，嚴(yán)重時導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
圖2. “黑膠蟲”污染
“黑膠蟲”污染常見表現(xiàn)：
?
培養(yǎng)液不渾濁，但在顯微鏡下觀察細(xì)胞時，細(xì)胞周圍和培養(yǎng)液中有很多“小黑點”，且隨著培養(yǎng)時間的延長，“小黑點”逐漸增多，更換培養(yǎng)液或洗滌細(xì)胞不能將其去除；
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細(xì)胞營養(yǎng)消耗快，需要頻繁更換培養(yǎng)液；
?
細(xì)胞生長緩慢，細(xì)胞狀態(tài)差，空泡化嚴(yán)重，甚至還可能出現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)的改變。
# 處理方法 #
若細(xì)胞狀態(tài)太差，建議最好直接丟棄，另外對培養(yǎng)箱做由里至外的清潔處理；
若細(xì)胞狀態(tài)尚可，那么在確定對細(xì)胞的基因及蛋白表達(dá)沒有影響的情況下，可以對應(yīng)使用支原體清除試劑或“黑膠蟲”清除試劑，培養(yǎng)2-3代可轉(zhuǎn)陰。
產(chǎn)品推薦
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
P-CMR-001 | Anti-Myc支原體清除試劑(200×) | 1mL/1mL×5 |
P-CMR-002 | Anti-Nano“黑膠蟲”清除試劑(200×) | 1mL/1mL×5 |
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使用普諾賽支原體清除試劑，3天之后即可見明顯清除效果；處理 15 天后，可以用支原體檢測試劑盒進行檢測，檢測支原體是否殺滅完全；如果仍有支原體殘留，可以考慮再處理 6 天。
使用普諾賽“黑膠蟲”清除試劑，3天之后，即可見明顯清楚效果；連續(xù)使用12-14天即可將“黑膠蟲”清除，若“黑膠蟲”污染較為嚴(yán)重，可延長處理3-5天。
